近年来,组学技术的快速进步已成为生物医学研究中机制探讨的重要工具。生物特征的表达是通过一系列复杂的生命活动实现的,基因突变、基因表达水平、蛋白质翻译后修饰及代谢变化等因素都对生命体特性的改变产生影响。转录组能够反映细胞或组织在特定生物过程中的基因活跃表达情况,成为连接基因组与蛋白组的桥梁。相比之下,蛋白组更接近生物体的功能状态,因为蛋白质是生物体执行大多数生物功能的重要分子。转录组学捕捉的是基因的瞬时状态,而蛋白组学则展现了基因的最终表现。
随着高通量测序技术的发展,转录组学已成为机制研究的优选方法,通过RNA-seq技术进行基因表达分析,推动了相关分子机制的深入研究。然而,mRNA的表达并不能完全代表蛋白质的表达,因为RNA在翻译过程中会受到翻译调控、RNA修饰等因素的影响,从而导致转录与蛋白表达之间的差异。近年来,随着高分辨质谱仪的更新,蛋白组学技术已成为阐明细胞功能和分子机制的重要手段,联合分析在高水平研究中日益普遍。
基于转录组和蛋白组的数据,我们可以系统地研究基因表达与蛋白调控之间的交互关系。基因与蛋白质之间的相互影响,有助于产生特定的生物功能。在转录组与蛋白组的联合分析中,研究者可以探讨基因的初始表达对蛋白形成的影响,同时挖掘基因表达产物对其自身表达的反调控作用,深入探讨其中复杂的分子关系。
研究案例
研究方案
分析内容:
- 转录组测序:
- 差异基因火山图:用于展示两组样品差异基因的显著性。
- 差异基因热图:直观呈现不同样本或分组中的基因表达变化。
- 富集分析气泡图:通过富集分析将基因进行分类,帮助理解基因背后的信息。
- 富集分析环状图:展示基因在不同通路中的富集情况。
- 富集通路的GSEA分析:重点关注基因整体表达趋势,从而全面解释某一功能单位的调节作用。
- KEGG网络图:展现通路与基因之间的关系,全面了解通路与通路、通路与基因的联系。
- 蛋白组分析:
- 差异蛋白柱状图:展示不同处理组合中差异蛋白的上调和下调情况。
- 差异蛋白质Venn图:展示整体蛋白的差异状况。
- 富集分析气泡图:展示不同处理下差异蛋白的功能背景。
- PPI蛋白互作网络:帮助识别差异蛋白中的关键节点。
- 联合分析:
- 基于富集通路的共表达分析:选取在不同组学水平显著富集的通路进行深入分析。
- 基于调控网络挖掘关键调控物质:展示不同物质间的调控关系,并筛选出关键调控因素。
- 基于相关性分析:筛选转录水平与蛋白水平上共同表达的基因/蛋白,进一步挑选候选进行验证。
相关研究案例
以下是两篇不同领域的转录组与蛋白组研究案例,展示如何通过分析方案发表高影响力的研究成果:
案例一:关于神经系统发育的研究,探索转录组与蛋白组在神经母细胞瘤模型中的调控机制。该研究通过高通量测序发现环境信号对神经母细胞瘤细胞迁移能力的影响,锁定了关键蛋白OLFM1在细胞粘附和转移中的角色,结果在Nature Communications上发表,影响因子达147。
案例二:研究低温对大蒜变绿现象的调控机制。在不同储存条件下,分析了大蒜的转录组与蛋白组,识别了影响绿色变现的关键分子,相关结果在Food Research International上发表,影响因子达70。
总结来说,蛋白组学是研究转录组与基因组的重要补充,转录组与蛋白组的联合分析有助于揭示基因表达与生物功能之间的复杂联系。这种方式不仅可更精确地锁定功能基因或蛋白,还能探讨两个组学在功能层面的变化,提供关键基因的深入生物学功能解析。
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