一、用途及原理
该培养基专用于金黄色葡萄球菌的检测。蛋白胨和酵母浸粉提供细菌生长所需的基本营养成分,磷酸氢二钾充当缓冲剂,甘露醇则作为可发酵的碳源。培养基中较高浓度的氯化钠可有效抑制不耐盐细菌的生长,而高浓度的硫酸铵会使明胶沉淀,从而使培养基呈现不透明状态。金黄色葡萄球菌能够适应高渗透环境,在此培养基中生长将不溶性大分子的明胶分解为小分子可溶性的氨基酸,使菌落周围的培养基变为透明。在发酵过程中,金黄色葡萄球菌还会分解培养基中的甘露醇并产酸,结束培养后可通过滴加酸碱指示剂来观察产酸现象。二、培养基配方(g/L)
- 蛋白胨:100
- 酵母浸出粉:25
- 磷酸氢二钾:50
- 明胶:300
- 甘露醇:100
- 氯化钠:550
- 硫酸铵:750
- 琼脂:150
pH值:7.2±0.2
三、配制方法
称取本品2025克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装后于121℃高压灭菌15分钟,冷却至45-50℃时,倾入无菌平皿备用。注意:由于培养基中含有较多的明胶及硫酸铵,灭菌后冷却时应摇匀,并立即在阴凉环境中倾倒平板,以确保平板快速凝固。制成的平板应呈均一的浑浊不透明状态,切忌在50℃左右长时间保温,以免培养基凝固。倾注平板前必须摇匀,并确保平板能快速凝固,若制成的平板呈透明状态,通常是由于培养基未摇匀或凝固过慢导致的。四、生长现象及结果观察
接种以下质控菌株,并在36±1℃下培养18-24小时:对于发酵甘露醇产酸现象的观察:用棉签轻轻去除平板上的菌落,然后在琼脂表面滴加0.04%溴酚紫溶液,并在无菌落生长的空白位置加一滴作为对照。如果溴酚紫变黄,则表明该菌能够发酵甘露醇并产酸。
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